色谱柱使用注意事项:如何更好的使用色谱柱

１、拿到色谱柱后先阅读说明书，了解色谱柱的具体性能：耐受温度、耐受ＰＨ等。

以及色谱柱的冲洗和保存条件。

经过柱校测试确认色谱柱本身没有问题后方可正常使用。

２、样品充分前处理，确保样品的洁净；使用保护柱或在线过滤器，根据实际情况更换保护柱芯或滤片。

３、避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。

４、应逐渐改变溶剂的组成，特别是反相色谱中如果流动相中使用了缓冲盐，避免出现盐析。

５、选择使用适宜的流动相（尤其是PH），以避免固定相被破坏，PH过低共价键断裂，键和相水解；PH过高硅胶溶解。

６、色谱柱使用过程中，如果压力升高，或出现污染，选择适当的条件冲洗或反冲。

适用于C18、C8、C4、C1、苯基、PFP、AQ等

使用至少20倍柱体积的含有≥30%谁的极性邮寄溶剂（如乙腈）作为流动相除去柱子中的缓冲盐；使用至少20倍柱体积的含有95%极性邮寄溶剂（如乙腈）冲洗色谱柱。

污染物的去除常规星期后柱校没有明显恢复时，使用50%异丙醇／乙腈以低流速清洗20倍柱体积以除去污染物。（以上操作可根据实验室自身SOP视情况而定，此方法仅为参考意见）

适用于氨基柱、氰基柱

常规清洗：乙腈：水＝60:40条件对色谱柱进行冲洗，清洗时不建议水相比例超过40%，过高使用水相容易导致键和相水解。

色谱柱再生：当色谱柱经过长期使用，柱校降低时，可以对色谱柱进行再生，乙腈：水（水中加入0.05%氨水）＝60:40条件冲洗30倍柱体积。（以上操作可根据实验室自身SOP视情况而定，此方法仅为参考意见）

适用于离子交换柱SCX、SAX冲洗方法

日常冲洗：用100%水冲洗30个柱体积除盐，然后用20%甲醇或乙腈冲洗20个柱体积后保存在20%甲醇或乙腈中。

长期保存：用100%水冲洗30个柱体积去除盐，然后用50%乙腈；50%水冲洗20个柱体积后保存在50%乙腈：50%水中。

再生：先用高浓度的缓冲盐（不超过１Ｍ），然后再用100%水洗，100%乙腈或甲醇冲洗，再用20%乙腈或甲醇保存。（以上操作可根据实验室自身SOP视情况而定，此方法仅为参考意见）