HPLC和LC/MS 缓冲液选择指南：pH值的实际影响

HPLC和LC/MS 缓冲液选择指南：pH值的实际影响

一般情况下，根据色谱柱和样品的特性，建议采用流动相pH值在2-3的范围内进行方法开发。

在这一pH范围下，大多数有机酸的电离将被抑制，而且色谱柱上的硅烷醇基团的电离也将受到抑制。

在这些条件下，碱基会被电离，但是大多数碱性化合物的pKa>7，因此如果在pH太高的情况下抑制电离会有害于大多数的色谱柱。

所以，在其它条件相同的情况下，最好是从较低的pH值开始。

如果您需要在高pH值下操作色谱柱，请确保所选色谱柱在您操作的pH区域内可以保持稳定。

如果低pH电离抑制无法提供可接受的结果，则可以调节流动相pH，以获得理想的分离效果。然而最具成效的是：调整流动相的有机物含量（％B溶
剂），从而获得中性和非离子化合物可接受的保留时间；然后调整pH，进而微调离子分析物的保留时间。