HPLC和LC/MS 缓冲液选择指南:仅关注低pH值?
如果只注重低pH值的流动相,则在pH为2时,0.1%v/v磷酸(表2)可为LC-UV应用提供有效的缓冲。
三氟乙酸(TFA)在0.1%v / v时也能产生pH约等于2的流动相(表2);而且,多年以来,它一直是低pH条件下LC-MS的首选添加剂。
TFA也可作为离子对试剂,广泛用于蛋白质和肽类的分离。
然而,在LC-MS界面中,TFA能够抑制电离,导致信号下降。
因此,近年来它已经不再被广泛使用了。
相反,对于低pH值,0.1%的甲酸(见表2,pH2.7)已经成为LC-MS的首选。
对于低pH值,如果使用一种酸,则假定pH值比缓冲能力更加重要;如果需要缓冲,则可从表2中选择涵盖所需pH值的缓冲液。