HPLC和LC/MS 缓冲液选择指南:仅关注高pH值?
如前所述,如果流动相pH值增加至8以上,硅胶的溶解度也会随之增加,所以通常不推荐pH>8。
然而,为了获得所需的分离,可能需要使用更高pH的流动相。
在这种情况下,您应该选择专门用于高pH值的色谱柱。
通常,高纯度硅胶、高“碳载量”和封端会降低硅胶的溶解度。
由于在高pH值下,磷酸盐缓冲液会增加硅胶溶解度,因此应避免使用。
在这种情况下,应使用有机缓冲液(如吡咯烷),它可以在高pH值下,帮助延长色谱柱的使用寿命。
即便对使用条件进行了筛选,在pH>8的情况下,色谱柱的使用寿命也会缩短。
不过,使用聚合物而非硅胶颗粒的色谱柱不易受到硅胶溶解度的影响,因此其可以在高pH值的情况下使用;但这类色谱柱无法具有硅基色谱柱那样较宽范围的固定相。