HPLC和LC/MS 缓冲液选择指南：缓冲液的制备
缓冲液有四种常用的制备技术，本文中将分别简要介绍。
缓冲液配方很容易查找，因此这里并未列出。许多生物化学和化学文献中均包含缓冲液的相关表格；附录[3]提供了用于HPLC的缓冲液配方汇编。
卓越的在线工具[4]会提示目标缓冲液的pH值、浓度和体积，然后生成配方。
制备缓冲液的最佳方法是根据配方称量缓冲液组分，并用水稀释至所需的体积。
最初，您可能觉得这一过程十分枯燥，但它更为准确，而且通常比pH调节技术更快；在不同时间和实验室可以实现轻松再现。
该技术提供了所需浓
度和pH值的缓冲液。配制后应检查pH值，确保未出现任何错误。
另一种可选的缓冲液制备技术是：首先制备单独的酸性和碱性缓冲液（例如分别具有10mM的磷酸和磷酸盐）。然后将两种溶液混合，并用pH计监测pH，直至其达到所需的pH值。
这样不仅可以提供所需浓度的缓冲液，还能够具有与pH计读数接近的pH值（通常使用±0.1个pH单位）。
混合酸和碱等摩尔溶液时，可以首先将一种组分配制为所需浓度（例如10mM的磷酸盐），然后再使用浓酸（例如磷酸）滴定，直至达到所需的pH。该缓冲液将比等摩尔混合物更浓，但目标pH值应正确（在pH计的界限内）。
最后，“improper”缓冲液制备技术应该被提及。
这就是在加入有机溶剂后调节pH值。尽管有机溶剂存在时可以获得pH值读数[5-7]，但不能直接与水状pH值的测量结果进行比较，因此pH的数值并不具有实际意义。
这种技术也比其它制备方法更易受其它因素（如有机物比例、温度）的影响，因此应尽量避免。
尽管如此，对于大多数方法来说，是否按重量、等摩尔混合或采用浓酸滴定等方法配制缓冲液并不会有较大影响，但某些方法会对细微差异较为敏感。
鉴于此，文档应包含缓冲液制备技术的相关说明。
