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我们先来了解下什么是鬼峰,鬼峰是液相色谱中最常出现的问题之一。
大家在做液相色谱反相系统梯度分析时,有时会遇到仪器不进样,也有出峰的情况,这种峰神出鬼没,变幻莫测,像个幽灵一样,所以被称为鬼峰。
鬼峰来源多种多样,理论上讲,在HPLC系统中任何一个节点均有可能引入鬼峰,依据鬼峰出现的频率,其主要来源可分为两个大方面:流动相和液相系统。
1.流动相(有机相和水相)
有机相
液相色谱分析的有机相建议使用色谱纯的有机溶剂,大多数有机相问题来自你的有机相流动相可能混入了杂质, 另外如果有机相使用完后未更换新的流动相瓶,而是采用直接添加补充的方式也有可能会产出鬼峰。
水相及其它试剂
液相色谱分析的水相建议使用二级以上的纯水,很多单位用自制蒸馏水作为水相,但是结果并不是很好。原因就是一些低沸点的有机杂质并不能够通过蒸馏除掉 此外,水相每天要更换,要现配现用,避免微生物滋长。缓冲盐、TFA、EDTA等试剂也会对流动相造成很大的影响,尽量用纯度高的试剂配制流动相。
2.液相系统
液相的流动相管路被污染
长时间的使用含水量较高的流动相(尤其是加入缓冲盐的),细菌就容易在管路中滋生,细菌的代谢产物或是细胞碎片能造成鬼峰。
检测器样品残留
多为一些样品组分在检测器流通池内的残留,其特点具有先后针之间的重复性差,或者没有重复性,色谱峰峰形特别尖锐类似大的毛刺
管道堵塞
造成系统压力不稳,从而产生鬼峰。
色谱柱中组分残留
色谱柱可对流动相或系统流路内的强保留污染组分起到富集作用,在有机相比例随梯度程序变化的过程中而被冲洗出来。
菲罗门Baseline色谱柱货号:FMB-BS5-EONU
通过以上的分析我们可以发现造成鬼峰出现的因素都是发生在流动相进入色谱柱之前的。
为了解决鬼峰的问题,菲罗门Baseline基线稳定柱是您不二的选择,菲罗门Baseline基线稳定柱的三大主要功用:
1、消除鬼峰;
2、减小或消除基线升高;
3、减小或消除梯度条件下的基线漂移;
下面一起来看看基线稳定柱的实际应用效果。
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