液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分组成,其中液相色谱柱的正确安装和使用,是液相色谱工作的关键;也是液相色谱工作者获得正确可靠的实验数据的必经之路。
菲罗门色谱柱安装时四个注意事项:
1.将液相色谱装置中的流动相完全置换后再连接菲罗门色谱柱,并完全排出流路内的空气。
装置内的液体和所使用的流动相不能相溶的情况下,使用双方都能相溶的液体做过渡。
将盐溶液置换成有机溶剂的时候,需要通过纯水、丙酮的顺序来进行置换。
相反,从有机溶剂转换成盐溶液的情况下,需要通过丙酮、纯水的顺序置换。
2.菲罗门色谱柱保存方法不对或者长期不使用的情况下,色谱柱的出入口可能会有空气残留。
这种情况下,必须先把空气完全排出后才连接到装置中。
避免快速加热,加热温度不要超过色谱柱的Z高负荷温度。
把柱子入口侧的螺栓打开,然后加温(一般加温到手心感到温暖的程度就足够了),等液体满出来以后接到装置上。
然后,打开出口处的螺栓,用泵送液,等确认出口处有液体流出后,连接到装置中。
这样操作,就算后面再连接一根色谱柱也能完全除去空气。
3.在泵运作的时候连接色谱柱。
确保能让流动相按照色谱柱上箭头的方向流动的状态连接菲罗门色谱柱。
4.菲罗门色谱柱加温使用的时候,先用0.2~0.3mL/min的低流量一边送液一边升温。
达到所定温度后,再渐渐的增加流量至测定流量。