色谱保留试剂飘忽不定的原因可能如下:
1. 色谱柱未达到充分的平衡。如果流动相中有使用弱酸、弱碱、缓冲盐和离子对试剂,或者固定相为正相硅胶等,需要更长的时间来平衡色谱柱。
2. 色谱柱受到污染或受损。这时也可能会导致保留时间的漂移,需要同时观察色谱峰型、柱效、压力的变化情况,推测色谱柱是否被污染。可以根据具体的测试条件来选择适当的溶剂进行色谱柱的冲洗,或更换新的色谱柱。为了延长色谱柱的使用寿命,增加保护柱是非常有效的方法。
3. 柱温变化。确认柱温的准确性,柱温的变化也会导致保留时间的变化。
4. 流动相改变。流动相中某种试剂的挥发,流动相中不同试剂的比例配制有误,也会导致保留时间的变化,需要确认流动相是否新鲜与正确。
5. 流速改变。观察柱前压力,如果压力不稳定或者偏离正常值,可能是泵流速不准确或者有气泡产生,出现保留时间的不稳定,需要保证仪器流速的准确性与稳定性。
6. 系统存在泄露或堵塞。观察系统压力,如果几次进样的压力曲线不能重合或差别比较大,可能是系统存在泄露或堵塞,出现保留时间的不稳定,需要依次排查系统中有无漏液或堵塞异常。