液相色谱仪紫外检测器的工作原理是:当一束单色光透过流动池时,若流动相不吸收光,则吸收度A与吸光组分的浓度C和流动池的光径长度L成正比。具体公式为:A=lg=lg=ECL。其中,I0为入射光强度,I为透射光强度,T为透光率,E为吸收系数。其依据是光吸收定律。从光源发出的光经狭缝、滤光片、样品池到光电培增管上,使束由于样品浓度不同所引起光强的变化转换成光电流的变化,此光电流经放大器输入到对数转换器,使透光率T转成A输出。根据上式就知测出了A,就知样品浓度C。若从放大器直接输入记录仪,绘出的是样品透光率T变化的图谱,若从对数转换器输入到记录仪绘出的是样品光密度A变化的图谱。
紫外检测器分为固定波长检测器、可变波长检测器和光电二极管阵列检测器。按光路系统来分,紫外检测器可分为单光路和双光路两种。可变波长检测器又可分单波长(单通道)检测器和双波长(双通道)检测器。PDAD是80年代出现的一种光学多通道检测器,它可以对每个洗脱组分进行光谱扫描,经计算机处理后,得到光谱和色谱结合的三维图谱。其中吸收光谱用于定性(确证是否是单一纯物质),色谱用于定量。常用于液相色谱仪对复杂样品(如生物样品、中草药)的定性定量分析。
紫外检测器的维护保养主要包括以下几点:
1. 保持检测器的清洁:由于紫外检测器对杂质非常敏感,任何杂质都可能导致检测结果的不准确或损坏检测器。因此,应定期清洁检测器,确保其表面无污垢和其他杂质。
2. 定期校准:为了确保检测器的准确性,应定期进行校准。校准过程包括检查光源、滤光片和光电转换器的性能,以确保它们正常工作。
3. 注意使用环境:应避免将紫外检测器暴露在高温、高湿或含有腐蚀性气体的环境中。这些环境因素可能导致检测器的性能下降或损坏。
4. 定期更换部件:随着时间的推移,某些部件可能会磨损或老化,如光源、滤光片和光电转换器等。因此,应定期检查并更换这些部件以确保检测器的性能。
5. 记录维护信息:每次维护检测器后,都应记录所进行的操作和维护项目。这有助于跟踪检测器的历史并快速识别可能存在的问题。
通过遵循这些维护保养要点,可以确保紫外检测器的长期性能和准确性,从而为液相色谱分析提供可靠的结果。