色谱柱的平衡时间取决于多个因素,如色谱柱的种类、品牌、规格,以及使用的流动相等。一般来说,当换上新的流动相后,需要大约10个柱体积的时间来达到基线平稳。对于内径为4.6mm、柱长为250mm的长柱,这通常意味着需要30-40分钟来平衡。
另外,如果考虑从柱子拿到手到平衡结束的总时间,这通常需要一小时到一个半小时。在这个过程中,还需要冲洗30-40分钟的甲醇水进行过渡。
请注意,平衡时间可能会因色谱柱的尺寸、保护柱和液路系统的保养情况,以及光源(如氘灯)能量的稳定时间等因素而有所不同。如果基线出现不规则的波动或有大小峰似的波动,可能是色谱柱或流路中有机物污染,需要更长时间的清洗和维护。
因此,具体的平衡时间应根据实验条件和需求来确定。在进行液相色谱分析时,建议参考相关仪器和试剂的说明书,并根据实际情况进行调整和优化。