当色谱柱进空气时，可以采取以下步骤来解决问题：
### 一、理解现象
首先，需要明确的是，如果流动相没了，泵的确会吸进去一些空气，但并不会持续地让空气流经整个系统。HPLC（高效液相色谱）的泵是专门设计来吸取液体的，一旦空气进入，泵就会失去灌注（lose prime）并停止工作。因此，虽然一些气泡可能会进入柱子，但这种情况不会一直持续。
### 二、处理措施
#### 1. 排气准备
* **取下色谱柱**：在排气之前，最好将色谱柱从系统中取下来，以避免在排气过程中对色谱柱造成不必要的冲击。
* **更换流动相**：换上新的、彻底脱气后的流动相。脱气是为了减少流动相中的溶解气体，避免在排气过程中产生更多的气泡。
#### 2. 清除泵和管道中的空气
* **打开排气阀**：进行正常灌注（prime the pump），确保泵能够重新建立灌注。对于某些型号的仪器，可能需要使用注射器进行手动灌注。
* **设定高流速**：设定一个较高的流速（如10 mL/min），并运行几分钟，以彻底清除泵里面以及管道里面残留的空气。
* **调整流速**：将流速调至1 mL/min，并关闭排气阀，继续运行直到彻底没有气泡排出。
#### 3. 清除色谱柱中的空气
* **连接柱子**：将色谱柱进口端连接好，出口端不要接检测器，而是接上一段管道，并用烧杯或废液瓶收集排出来的流动相。
* **逐步增大流速**：启动泵并逐步增大流速，直到柱压达到3000-4000 psi（高压能够将气泡压缩回溶液并排出柱子）。持续运行10分钟左右，直到没有气泡从柱子的尾端排出。
#### 4. 冲洗系统
* **更换流动相**：将流动相换成100%的甲醇或乙腈，这两种有机溶剂的粘度相对较低，有助于清除系统管道和色谱柱中的残留空气。
* **冲洗柱子**：用甲醇或乙腈冲洗色谱柱一段时间，确保柱子中的空气被完全清除。
### 三、后续检查
* **检漏**：排气完成后，要特别注意检查系统是否有泄漏。如果没有观察到明显的泄漏，要注意观察泵在正常运行下的柱压是否正常和稳定。如果柱压没有问题，就说明泵和系统是正常的。
* **更换密封垫**：如果观察到柱压偏低或波动，可能是密封垫磨损所致，此时需要更换密封垫。
### 四、注意事项
* 在处理过程中，要避免对色谱柱造成物理损伤或化学污染。
* 如果色谱柱因长期储存而变干燥，也可以使用上述方法使其恢复良好状态。
* 不同的色谱柱和仪器可能需要不同的处理方法和步骤，因此在实际操作中应根据具体情况进行调整。
通过以上步骤，可以有效地解决色谱柱进空气的问题，并确保色谱系统的正常运行和分析结果的准确性。
