手性柱正反相模式的切换方法需要谨慎操作，以确保色谱柱的性能和分离效果不受影响。以下是一个通用的切换步骤，但请注意，不同品牌和型号的手性柱可能有特定的切换要求，因此在实际操作中应参考色谱柱的说明书。
### 一、切换前的准备
1. **了解色谱柱特性**：
- 确认色谱柱是否支持正反相模式的切换。
- 了解色谱柱的耐受范围，包括pH值、溶剂类型等。
2. **准备所需溶剂**：
- 准备异丙醇或其他过渡溶剂。
- 准备正相和反相流动相所需的溶剂。
3. **冲洗色谱系统**：
- 在切换之前，使用当前流动相冲洗色谱系统，包括色谱柱、进样器、检测器等部分，以确保系统清洁。
### 二、切换步骤
1. **降低系统压力**：
- 在切换过程中，应尽量避免系统压力突然升高，以免损坏色谱柱。
2. **使用过渡溶剂**：
- 将当前流动相逐渐替换为异丙醇或其他过渡溶剂。这一步是为了减少流动相切换时对手性固定相的冲击。
- 过渡溶剂的流速应适当降低，以延长冲洗时间，确保充分过渡。
3. **切换流动相**：
- 当过渡溶剂完全替代当前流动相后，可以开始切换为正相或反相流动相。
- 切换时，应逐渐调整流动相的比例，避免突然改变。
4. **平衡色谱柱**：
- 在新的流动相下，让色谱柱运行一段时间以进行平衡。平衡时间取决于色谱柱的类型和所需的分离效果。
5. **调整仪器参数**：
- 根据新的流动相和分离需求，调整仪器的参数，如流速、检测波长等。
### 三、切换后的注意事项
1. **监测色谱柱性能**：
- 切换后，应密切监测色谱柱的性能，包括分离度、峰形等。
- 如发现性能下降或异常，应及时查找原因并采取相应措施。
2. **避免频繁切换**：
- 频繁切换正反相模式可能会对色谱柱造成损害。因此，在实际应用中，应尽量避免不必要的切换。
3. **记录切换过程**：
- 记录切换过程中的关键步骤和参数，以便在出现问题时能够追溯原因。
### 四、特定品牌手性柱的切换要求
- 对于某些特定品牌的手性柱（如大赛璐、菲罗门等），可能需要遵循特定的切换步骤和要求。例如，大赛璐手性柱在正相和反相流动相之间进行切换时需要用异丙醇小流速的过渡，且压力不能超过100bar。菲罗门Chiral N与M系列的正相与SFC用手性柱在正相和SFC分离模式之间切换时也必须用异丙醇过渡。
综上所述，手性柱正反相模式的切换需要谨慎操作，并遵循特定的步骤和要求。在实际应用中，应参考色谱柱的说明书并密切监测色谱柱的性能。
