色谱柱性能下降的原因及维护

色谱柱性能下降的原因及维护方法具体如下：

### 一、色谱柱性能下降的原因

1. **热损坏**：

* 超出色谱柱的温度上限会导致固定相和管表面的加速损坏，从而造成色谱柱的过度流失、活性组分形成拖尾，以及降低柱效（分离度）。

2. **氧损坏**：

* 氧是许多毛细管GC柱的大敌。在室温或近于室温的温度下，不会损坏色谱柱，但随柱温的升高色谱柱将被严重损坏。

3. **化学损坏**：

* 长时间暴露在化学试剂中可能导致色谱柱的损坏，特别是流动相中的某些化学物质可能对柱填料产生损伤。

4. **样品污染**：

* 样品中可能存在的颗粒物或化学物质会污染色谱柱，导致性能下降。

5. **柱架问题**：

* 柱架不稳定或受到振动可能导致色谱柱性能下降。

6. **流动相问题**：

* 流动相的质量不合格或组成发生变化可能导致色谱柱性能下降。

7. **贮存与维护不当**：

* 长期改变色谱柱的使用频率或放置在不适宜的环境中可能导致填充物泄漏。

### 二、色谱柱的维护方法

1. **避免压力和温度的急剧变化**：

* 温度的突然变化或使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况。

* 柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料，因此，在调节流速时应缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓。

2. **逐渐改变溶剂的组成**：

* 特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂改变为全部是水，反之亦然。

3. **避免反冲**：

* 一般说来色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。

4. **选择适宜的流动相**：

* 选择使用适宜的流动相（尤其是pH），以避免固定相被破坏。

* 有时可以在进样器前面连接一预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”，避免分析柱中的硅胶基质被溶解。

5. **定期冲洗色谱柱**：

* 经常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质。

* 在进行清洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右。

6. **正确的保存方法**：

* 保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇，柱接头要拧紧，防止溶剂挥发干燥。

* 禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。

7. **处理色谱柱使用过程中可能出现的问题**：

* 色谱柱使用过程中，如果压力升高，可能是烧结滤片被堵塞，这时应更换滤片或将其取出进行清洗。

* 如果柱效降低或色谱峰变形，可能是柱头出现塌陷，死体积增大。此时应小心拧开柱接头，用洁净小钢将柱头填料取出1\~2mm高度（注意把被污染填料取净），再把柱内填料整平。

* 在分析柱前装一根与分析柱相同固定相的短柱（5\~30mm），可以起到保护、延长柱寿命的作用。

8. **补加填料**：

* 新的色谱柱在使用一段时间后柱顶填料可能塌陷，使柱效下降，这时可补加填料使柱效恢复。

9. **使用后的处理**：

* 每次工作完后，用洗脱能力强的洗脱液冲洗。例如，ODS柱宜用甲醇冲洗至基线平衡。

* 当采用盐缓冲溶液作流动相时，使用完后应用无盐流动相冲洗。

10. **其他注意事项**：

* 含卤族元素（氟、氯、溴）的化合物可能会腐蚀不锈钢管道，不宜长期与之接触。

* 装在HPLC仪上柱子如不经常使用，应每隔4\~5天开机冲洗15分钟。

综上所述，色谱柱性能下降的原因多种多样，而正确的维护方法可以有效延长色谱柱的使用寿命并提高分析结果的准确性。