氨基柱进酸性样品后柱效降低

1. 现象描述

氨基柱进酸性样品后，出现：

柱效降低（表现为峰变宽、塔板数下降、分离度下降）

有时柱压也略有升高

色谱峰更不对称，甚至基线漂移

2. 原因分析

（1）固定相氨基官能团易被酸损伤/析出

氨基柱的固定相是氨丙基（-NH₂(CH₂)₃-）键合在硅胶表面。

这类官能团本身就是作为极性作用点，被强酸性流动相或样品进柱冲洗后，易被酸水解、断裂或部分溶解，导致固定相流失。

譬如在酸性条件下：Si-O-Si(CH₂)₃NH₂ + H⁺ → Si-OH + Si(CH₂)₃NH₃⁺ 等反应

结果：固定相极性功能性减少/丢失，分离能力变差，柱效必然下降。

（2）酸与氨基基团反应导致化学活性丧失

氨基为碱性，遇酸易质子化为NH₃⁺，极性和化学活性状态改变，分离机制被扰乱。

反复多次后，键合层恒久性化学破坏，柱效彻底损伤。

（3）硅胶基体本身在强酸（或极酸性环境）下容易溶解

pH < 2时，硅胶骨架可能逐步溶蚀；

氨基柱对pH更为敏感（比C18等烷基柱还“脆弱”）。

3. 实际应用提示

氨基柱建议在pH 3-8 或更窄范围使用，不宜遇强酸（流动相或进样酸性过强都不合适）。

进酸性（如含强酸、低pH有机酸等）样品，建议先中和后进样，或直接选用更耐酸类型色谱柱（如C18或特殊耐酸柱）。

柱效降低不可逆，严重时柱子需更换。