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DMSO(二甲基亚砜)本身不是会“溶毁”柱子的一般溶剂,但它的物理化学性质和对检测/色谱行为的影响会带来一系列问题,必须按情况处理。下面按要点说明并给出可操作的建议。 要点概览 DMSO 与水、甲醇、乙腈互溶,但与非极性溶剂(如己烷)不相容。 DMSO 黏度高、沸点高(难挥发)、UV 截止波长高(约在 ~268 nm 附近),会增加柱压且在紫外检测下干扰波形。 在 LC‑MS 中 DMSO 会产生明显背景、离子化干扰或形成加合物(既可能抑制,也可能增强某些离子信号)。 直接大体积注入纯 DMSO 的样品到以弱起始流动相(高水相)的反相柱,常会造成峰前展宽、拖尾、分辨丢失甚至样品沉淀。 具体影响与注意 对柱子的化学相容性 大多数硅胶基反相(C18、C8)和聚合相(PS-DVB 等)对 DMSO 是化学兼容的,但仍要参照厂商的溶剂相容表。少数特殊键合相或涂层在强极性溶剂中性能会变化,需确认。 黏度与柱压 DMSO/water 混合物黏度明显高于 ACN/water,含较多 DMSO 时会显著提升系统背压,应避免高温以外的长期大比例使用。 UV 检测影响 DMSO 在低波长(<270 nm)有强吸收,会抬高基线或掩盖吸收峰。若检测波长常在 210–254 nm,DMSO 会严重干扰。 MS 检测影响 DMSO 在 ESI/APCI 中会产生背景离子,且可改变溶液化学环境,导致目标化合物信号抑制或出现 adduct(加合物)/簇化离子。低含量(很小百分比)有时会被用作“doping”以增强信号,但这需专门优化。 注入溶剂效应(最常见的问题) 若样品溶解在纯 DMSO,而起始流动相为高水相,强溶剂(DMSO)会导致峰拓宽、分离差、重现性差;严重时还会造成不可逆吸附或基线扰动。 实用建议(可直接操作) 优先把样品稀释/换溶剂:尽量将样品从纯 DMSO 转入与起始流动相相似的溶剂(如起始为 5–10% ACN/water,就用相同比例稀释)。若原液必须用 DMSO 保存,可在进样前做二次稀释(例如 1:10 至 1:100)到 mobile‑phase‑matched 溶剂。 限制注入体积:若确实需用含 DMSO 的溶液,尽量用极小注入体积(分析柱常 <1–5 µL,视柱尺寸而定)。 控制 DMSO 含量:作为经验值,在 LC‑MS 工作中令最终进入柱内的 DMSO 含量尽量 <1%(最好 <0.1%)以减少离子化干扰;在普通 UV‑HPLC 中尽量避免超过几 %,且检测波长需高于 DMSO 吸收影响区域。 使用保护措施:装用前置柱/保护柱以防柱损害,运行后用有机洗脱(如高 ACN 或 MeOH)和再水化步骤彻底冲洗,以去除残留 DMSO。 仪器维护与洗针:DMSO 易造成进样系统粘附与交叉污染,使用强洗针液并增加空白注射以检查残留。 查厂商资料:在方法开发前查色谱柱厂家的溶剂兼容表,确认是否允许长期使用高极性溶剂。 对于正相/正相(HILIC)或非极性正常相:DMSO 通常不适合做移动相主溶剂(与非极性溶剂不混溶或破坏分配行为),HILIC 中少量可用,但仍要评估效果。 故障排查(若已经用 DMSO 出现问题) 若出现高背压:考虑是 DMSO 高黏度或样品沉淀,停止运行,逐步用高有机冲洗再回到起始条件,检查柱压恢复与色谱峰形。 若 UV 基线不稳或无法识别峰:改用更高波长或更换样品溶剂后重跑。 若 LC‑MS 信号异常或强背景:减少 DMSO 含量或改用 ACN/MeOH,并做空白与溶剂对照,查看特征背景离子。 总结建议(简短) DMSO 可以进入色谱柱,但尽量避免直接注入大量纯 DMSO 溶液;优先稀释/换溶剂或用与移动相匹配的溶剂,注入体积要小,运行后做好冲洗和维护。对于LC‑MS、低波长UV检测或正常相色谱,要特别谨慎或避免使用。始终参照色谱柱厂家的兼容性说明并做好方法验证。 |
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