食品中三聚氰胺检测的固相萃取方法

（Polyclean X-MCX）

一、实验目的

本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法，HPLC 法作为检测手段。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。

二、实验目标物

三聚氰胺 (CAS: 108-78-1)

三、应用范围

本方法适用于食品中三聚氰胺的 HPLC 检测及确证。四、参考标准

推荐性国家标准《GBT 22388-2008 原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》五、实验材料

NuAnalytical Polyclean X-MCX 固相萃取柱 3mL/60mg。六、实验方法

1、样品提取

称取 2.0ｇ试样（精确至 0.001ｇ）于 50mL 离心管中，加入 15ｍＬ 1%三氯乙酸溶液和

5mL 乙腈，超声提取 10min，再震荡提取 10min，以不低于 4000r/min 离心 10min。上清液经三氯乙酸溶液润湿的滤纸过滤后，用三滤乙酸溶液定溶至 25Ml,移取 5mL 滤液，加入 5mL 水混匀后做带净化液。

2、SPE 柱活化

使用前依次用 3mL 甲醇、5mL 水活化柱子。

3、上样和洗脱

将 2 中的待净化液转移至固相萃取柱中。依次用 3mL 水、3mL 甲醇洗涤，抽至近干后， 用 6mL 5%氨化甲醇溶液洗脱。整个固相萃取过程流速不超过 1mL/min。

4、重新溶解

洗脱液于 50 度下用氮气吹干，残留物用 1mL 流动相定溶，涡旋混合 1min，过微孔滤膜后，供 HPLC 测定。

5、HPLC 条件

色谱柱：SuperLu C18 (250×4.6mm，5μm)

检测器：UV@240 nm

流动相： A-离子对试剂缓冲液（准确称取 2.10g  柠檬酸和 2.16g  辛烷磺酸钠，加入约

980mL 水溶解，调节PH 至 3.0 后，定溶至 1L 备用） B-乙腈

洗脱方式：等度洗脱，A:B=80 : 20

柱温：室温         进样体积:20 μL