APP ID NO. : FLM-S170014

动物性食品中磺胺类药物多残留检测的固相萃取方法
（PolyClean X-MCX）

一、实验目的

本研究利用固相萃取法作为猪肉样品中磺胺类药物残留检测的前处理方法，HPLC法作为检测手段。PolyClean X-MCX(60 mg/3mL)柱净化效果良好，回收率满足测试要求，重现性好，与知名厂商同型号柱性能相当。

二、实验目标物

磺胺醋酰(CAS:144-80-9)，磺胺吡啶(CAS:144-83-2)，磺胺对甲氧嘧啶(CAS:651-06-9)，磺胺甲基嘧啶(CAS:127-79-7)，磺胺二甲基嘧啶(CAS:57-68-1)。

三、应用范围

本方法适用于动物性食品中磺胺类药物多残留的HPLC检测及确证。

四、参考标准

《GB 29694-2013 食品安全国家标准动物性食品中13 种磺胺类药物多残留的测定高效液相色谱法》

五、实验材料

NuAnalyticalPolyCleanX-MCX固相萃取柱60 mg/3 mL，W品牌MCX固相萃取柱6

0mg/3mL。

六、实验方法

1、样品待测溶液制备

称取猪肉试料(5±0.05)g，于50mL离心管中，加乙酸乙酯20mL，涡旋2min，4000r/min

离心5 min，取上清液于100 mL鸡心瓶中，残渣中加乙酸乙酯20 mL，重复提取一次，合

并两次提取液。鸡心瓶中加0.1mol/L盐酸溶液4mL，于40 ℃下旋转蒸发浓缩至少于3mL，

转至10 mL离心管中。用0.1 mol/L盐酸溶液2 mL洗鸡心瓶，转至同一离心管中。再用正己烷3 mL洗鸡心瓶，将正己烷转至同一离心管中，涡旋混和30s，3000r/min离心5min，弃正己烷。再次用正己烷3 mL洗鸡心瓶，转至同一离心管中，涡旋混和30 s，3000 r/min离心5 min，弃正己烷，取下层液备用。

2、活化

依次用甲醇2 mL和0.1 mol/L盐酸溶液2 mL活化。

3、上样和洗脱

取备用液过柱，控制流速1 mL/min。依次用0.1 mol/L盐酸溶液1 mL和50%甲醇乙

腈溶液2 mL淋洗，弃去淋洗液。用5%氨化甲醇4 mL洗脱，收集洗脱液。

4、重新溶解

洗脱液于40 ℃氮气吹干，加0.1％甲酸乙腈溶液1.0 mL溶解残余物，滤膜过滤，供

HPLC测定。

5、HPLC条件

色谱柱：SuperLu C18 (250×4.6mm，5μm)
检测器：UV@ 270 nm

柱温：室温
流速：1.0mL/min
进样量：20μL

流动相：A:乙腈 B:0.1%甲酸水溶液
洗脱方式：梯度洗脱，
梯度条件如下：

时间/min	A/%	B/%
0.0	17	83
5.0	17	83
10.0	20	80
22.0	40	60
22.1	90	10
28.0	90	10
29.0	17	83
33.0	17	83

七、实验结果

1、0.2 mg/kg猪肉基质中磺胺的添加回收结果

名称	1	回收率（%） 2	3	平均回收率（%）	RSD（%）
磺胺吡啶	106.00	106.50	103.00	105.17	1.84
磺胺甲基嘧啶	102.50	104.50	105.50	104.17	1.45
磺胺二甲基嘧啶	104.50	105.00	104.50	104.67	0.28
磺胺对甲基嘧啶	103.50	102.50	103.50	102.83	0.56

表2 W品牌0.2mg/kg猪肉基质中磺胺的添加回收结果

	回收率（%）
名称			平均回收率（%）	RSD（%）
	1	2
磺胺吡啶	104.00	110.00	107.00	3.86
磺胺甲基嘧啶	106.50	106.50	106.50	0.00
磺胺二甲基嘧啶	107.00	106.50	106.75	0.33
磺胺对甲基嘧啶	106.50	107.00	106.75	0.33

2、添加水平为0.2mg/kg猪肉基质中磺胺检测色谱图

图1 添加水平为0.2 mg/kg猪肉基质中磺胺检测色谱图

动物性食品中磺胺类药物多残留检测的固相萃取方法

动物性食品中磺胺类药物多残留检测的固相萃取方法 （PolyClean X-MCX）