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动物源性食品中克伦特罗等3种β-受体激动剂残留检测

（Polyclean X-MCX）

一、实验目的

本研究利用固相萃取法作为动物源性食品(动物肌肉和肝脏)中克伦特罗(clenbuterol)、沙丁胺醇(salbutamol)、莱克多巴胺(ractompamine)等3种β-受体激动剂的样本前处理净化方法，

HPLC法作为检测手段。Polyclean X-MCX (60mg/3mL)柱净化效果良好，回收率满足测试要求，重现性好，与知名厂商同型号柱性能相当。

二、实验目标物

克伦特罗(CAS:37148-27-9)、沙丁胺醇(CAS:18559-94-9)、莱克多巴胺(CAS:97825-25-7)。

三、应用范围

本方法适用于动物源性食品(动物肌肉和肝脏)中克伦特罗(Clen)、沙丁胺醇(Sal)、莱克多巴胺(Rac)等3种β-受体激动剂残留药物的检测。

四、参考标准

《GB/T22286-2008   动物性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定液相色谱串联质谱法》

五、实验材料

NuAnalytical Polyclean X-MCX固相萃取柱60mg/3mL，W品牌MCX固相萃取柱60m

g/3mL。

六、实验方法

1、样品待测溶液制备

称取2±0.01 g经捣碎的猪肉样品，于50 mL离心管中，加8 mL乙酸钠缓冲液(0.2 mo

l/L，pH5.2)，振荡提取15min，4000 r/min离心10min，取上清液4 mL于50 mL离心管中，并加入0.1 mol/L高氯酸溶液5 mL，混合均匀，用高氯酸调节pH到1±0.3。4000 r/mi

n离心10min后将全部上清液转移到50mL离心管中，用10mol/L氢氧化钠溶液调节pH到11。加入10mL饱和氯化钠和10mL异丙醇-乙酸乙酯(6:4,v/v)混合溶液，充分提取5 min，在4000r/ min离心10 min。

转移全部有机相，在40 ℃水浴下氮吹干。加入5 mL乙酸钠缓冲液(0.2 mol/L，pH5.2)，超声混匀，使残渣充分溶解后备用。。

2、活化

依次用3 mL甲醇和3 mL水活化。

3、上样和洗脱

取上述残渣溶液上柱，控制流速0.5 mL/min。后依次用2 mL水、2 mL 2%甲酸水、2

mL甲醇淋洗柱子并抽干，最后用2 mL5%氨化甲醇溶液洗脱柱子上的待测成分。

4、重新溶解

收集洗脱液，于40℃氮气吹干，准确加入1.0 mL 0.1%甲酸/水-甲醇(95:5，v/v)溶液溶解残余物，0.22 μm滤膜过滤，供HPLC测定。

5、HPLC条件

色谱柱：SuperLu C18 (250×4.6mm，5μm)

检测器：UV@ 249 nm，荧光激发波长226nm，发射波长306nm

柱温：30℃    流速：1.0mL/min           进样量：20μL

流动相：A:甲醇      B:0.1%甲酸水溶液 洗脱方式：梯度洗脱，梯度条件如下：

时间/min	A/%	B/%
0.0	10	90
8.0	48	52
15.0	48	52
15.1	10	90
22.0	10	90

七、实验结果

1、添加水平为1.0 mg/kg猪肉基质中克伦特罗(Clen)、沙丁胺醇(Sal)、莱克多巴胺(Rac)等3

种β-受体激动剂的添加回收结果

表1  添加水平为1.0mg/kg猪肉基质中3种β-受体激动剂的添加回收结果

回收率（%）

名称	1	2	3	平均回收率（%）	RSD（%）
克伦特罗	85.0	88.4	89.4	87.6	2.6
沙丁胺醇	84.4	85.4	88.2	86.0	2.3
莱克多巴胺	85.0	86.6	88.4	86.7	2.0

表2   W品牌同型号柱，添加水平为1.0mg/kg猪肉基质中3种β-受体激动剂的添加回收结果

	回收率（%）
名称			平均回收率（%）
	1	2
克伦特罗	79.9	78.4	79.2
沙丁胺醇	86.4	84.6	85.5
莱克多巴胺	86.9	81.8	84.4