APP ID NO. : FLM-S170018
进出口食品中罗丹明 B 的检测的固相萃取方法
（SuperClean AL-N）
一、实验目的
本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法，HPLC 法作为检测手段。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。
二、实验目标物
罗丹明 B(CAS:81-88-9)
三、应用范围
本方法适用于进出口食品中罗丹明B 的检测的HPLC 检测及确证。
四、参考标准
《SN/T 2430-2010 进出口食品中罗丹明 B 的检测方法》
五、实验材料
NuAnalytical SuperClean AL-N 中性氧化铝固相萃取柱 1g/6mL。
六、实验方法
1、 样品待测溶液制备
称取辣椒粉 2 g（精确至 0.01）于 50 mL 离心管中，准确加入 20 mL 20%丙酮正己烷，于涡旋混匀器上混合提取 2 min，再超声提取 15 min，于 4000 r/min 离心 5 min，上清液过滤待净化。
2、活化
依次用 6 mL 正己烷活化。
3、上样和洗脱
取待净化液 10 mL 加入中性氧化铝小柱，1 滴/秒流速通过中性氧化铝小柱后，弃去溶液，加入 10 mL 丙酮-正己烷溶液(20:80, v/v)淋洗，弃去淋洗液，抽干小柱。取 10 mL 2%氨水甲醇溶液洗脱小柱，收集洗脱液，洗脱液于 50 ℃氮吹至干。
4、重新溶解
用 1 mL 甲醇定容，0.22μm 微孔滤膜过滤，供HPLC 测定。
5、HPLC 条件
色谱柱：SuperLu C18 (250×4.6mm，5μm)
检测器：Waters 2475 荧光检测器，λex=550 nm，λem=580 nm
流动相：A:水 B:甲醇
洗脱方式： 等度洗脱，A:B=25 : 75
柱温：室温
流速：1.0 mL/min
进样量：20μL
七、实验结果
1、 25µg/kg 辣椒粉中罗丹明B 的添加回收结果
表 1 25µg/kg 辣椒粉中罗丹明 B 的添加回收结果回收率（%）
|
2、添加水平为 25µg/kg 辣椒粉中罗丹明B 检测色谱图
图1 添加水平为25µg/kg辣椒粉中罗丹明B检测色谱图
