化妆品中氢化可的松检测的固相萃取方法

 

化妆品中氢化可的松检测的固相萃取方法

（PolyClean X-HLB）

一、实验目的

本研究利用固相萃取作为样品前处理方法，HPLC作为分析方法，检测化妆品样品中的氢化可的松的残留水平。该方法操作简便，可简化样品前处理过程，减少有机溶剂的使用。

 

二、实验目标物

氢化可的松(CAS:50-23-7)

 

三、应用范围

本方法适用于化妆品中氢化可的松的检测的HPLC检测及确证。

 

四、参考标准

《GB/T 24800.2-2009化妆品中四十一种糖皮质激素的测定 液相色谱/串联质谱法和薄层层析法》

 

五、实验材料

NuAnalyticalPolyCleanX-HLB固相萃取柱60mg/3mL。

 

六、实验方法

1、 样品待测溶液制备

准确称取沐浴露0.2 g(精确到0.01 g)于10 mL具塞塑料离心管中，加入3 mL饱和的氯化钠溶液，涡旋振荡1min使样品分散，准确加入2mL乙腈，充分涡旋提取2min，5000r/min离心10 min，吸出上层清液于另一50 mL具塞塑料离心管中，下层氯化钠溶液用2 mL乙腈重复提取步骤一次，合并二次乙腈提取液，往提取液中准确加入40 mL高纯水，混匀， 加入10% 亚铁氰化钾水溶液0.2mL，混匀，加入20% 乙酸锌水溶液0.2mL混匀，5000r/min离心10 min，上清液待净化。

 

2、活化

依次用5 mL甲醇和10 mL水活化。

 

3、上样和洗脱

将待净化液的样品溶液加入已活化好的固相萃取柱中，以1 mL/min的流速过柱，弃去滤液。用2×5 mL乙腈-水溶液(10:90,v/v)淋洗固相萃取柱，弃去淋洗液，用吸耳球吹出小柱中残留液。用4 mL甲醇洗脱固相萃取柱，收集洗脱液。

 

4、重新溶解

洗脱液于40℃氮气吹干，用2 mL甲醇-水溶液(5:5, v/v)定容，0.22 μm微孔滤膜过滤， 供HPLC测定。

 

5、HPLC条件

色谱柱：SuperLu C18 (250×4.6mm，5μm)

检测器：UV@254 nm

流动相：A:乙腈           B:0.1 mol/L甲酸水溶液

柱温：室温               

流速：1.0mL/min            

进样量：20μL

洗脱方式：梯度洗脱，

梯度程序如下：

时间/min	A/%	B/%
0.0	20	80
15.0	40	60
15.1	90	10
19.0	90	10
19.1	20	80
21.1	20	80

 

七、实验结果

1、化妆品中氢化可的松的10mg/kg添加回收结果

表1   化妆品中氢化可的松的10mg/kg添加回收结果

名称	回收率（%）			平均回收率（%）	RSD（%）
	1	2	3
氢化可的松	98.8	97.9	98.5	98.4	0.46