血清中皮质甾类药物检测的快速萃取方法

（SuperClean SLE）

一、实验目的
应用SuperClean SLE液-液萃取柱快速提取人体血清中皮质甾类药物。

二、实验目标物
曲安西龙（CAS:124-94-7）、氢化可的松（CAS:50-23-7）

三、实验材料
NuAnalytical SuperClean SLE液-液萃取柱1 mL。

四、实验方法

1、 样品预处理
将血清样品纯水稀释并混匀，使样品最终的pH接近8.0。取一部分空白稀释血清备用；剩下的空白稀释血清加入一定体积的氢化可的松和曲安西龙储备液，配制成浓度为1.5 mg/L的氢化可的松和曲安西龙加标血清。

2、上样
向SLE柱中加入1 mL预处理的样品，加负压启动流速(5-15秒)，然后让样品吸附于填料中约5分钟。

3、 洗脱
向柱中加入4 mL乙酸乙酯，使溶剂通过重力流出并收集洗脱液，然后再向柱中加入4mL的乙酸乙酯。在收集结束后加适当的正力或负压(-15" Hg)2分钟并收集最终洗脱出的溶剂。

4、浓缩
将上述收集的洗脱液于35℃左右的温度低真空下浓缩，再用缓氮气流祛除乙醚溶液， 使其浓缩至近干。取1 mL(60:40, v/v)的水/甲醇定容，过0.22 µm滤膜，供HPLC测定。

5、HPLC条件
色谱柱：SuperLu C18 (250×4.6mm，5μm)
检测器：UV@245 nm     
流动相：A: 乙腈 B:0.1%甲酸水溶液
柱温：室温             
流速：1.0 mL/min            
进样量：20μL
洗脱方式：梯度洗脱，
梯度程序如下：