重要的是要认识到色谱柱的选择性和柱效是独立的变量,在开发分离方法时您不必选择使用一种而不使用另一种。事实上,为了实现最佳的总体分离效果,您应当对上述两个变量以及保留值进
行优化。当需要实现高速分离时尤其如此。(参见图7)
图 7:利用柱效和键合相选择性来开发更快的分离方法
条件:
流动相:
A = 5mM甲酸(0.189)ml / L;
A = 5mM甲酸(溶于甲醇中)
柱温:40℃
检测:PDA, 254nm
样品:
1. 阿司匹林
2. 非那西丁
3. 1,3-二硝基苯
4. 苯甲酸乙酯
5. 尼美舒利
6. 布洛芬
7. 吲哚美辛
利用UHPLC色谱柱更高的柱效,可在更高的流动相流速下使用更短的色谱柱,以使这种混合物的分离时间缩短80%(相比HPLC色谱柱)。
然而,也可以通过优化键合相的选择性来进一步缩短分离时间,在这个案例中,就是利用了C18-PFP键合相所具有的增强的选择性。
与C18UHPLC色谱柱、C18 HPLC色谱柱相比,ACE Excel C18-PFP UHPLC色谱柱分别将混合物的分离时间缩短了80%以上以及96%,同时保持了所有峰的极佳分离度。
ACE Excel UHPLC色谱柱的设计旨在充分利用低扩散、超高压UPLC®和UHPLC仪器(高达1000 bar),并可与所有市售UPLC和UHPLC系统相兼容。
ACE Excel UHPLC色谱柱可以为碱性化合物提供更佳的峰形,改善柱子与柱子之间的重现性,提供额外的利用多种分离机制的固定相,以及改善色谱柱的耐用性。
ACE Excel UHPLC色谱柱的可用性意味着色谱分析师在使用UPLC和UHPLC仪器时有更多的选择来获得更好的结果。
图 8:ACE Excel色谱柱提供快速、高分辨率的分离
条件
色谱柱:ACE Excel C18, 2 μm, 3.0 x 50 mm
流动相:60秒内从30%B至100%B
A =水+ 0.1%TFA B =乙腈
流速:2.5 mL/min
柱温:40ºC
压力:703 bar (10,335 psi)
检测:PDA, 254 nm
仪器:安捷伦1290 UHPLC
化合物
1. 乙酰苯胺
2. 苯乙酮
3. 苯丙酮
4. 苯丁酮
5. 二苯甲酮
6. 苯戊酮
7. 苯己酮
8. 苯庚酮
9. 苯辛酮
ACE Excel C18色谱柱可在不到60秒内提供这9种分析物的基线分离。